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Polysciences全國代理-上海鼎桑

Polysciences全國代理-上海鼎桑

更新時(shí)間(jiān):2025-08-22

産品特點:
Polysciences全國代理-上海鼎桑 美國POLYSCIENCES公司成立於1961年,主要生産和經營LIFE SCIENCES生命科學(膠體金,不含甲醛的甲醇等),病理學和顯鏡學 微球和粒子和磁珠各種單體和聚體等産品。polysciences公司是世界上zui大zui全的多聚化合物供應商,同時是世界*的免疫學,組織化學試劑耗材供應商.
産品介紹
産地進口加工定制

我們公司zui大優勢是強大的採(cǎi)購(gòu)

  上海鼎桑生物科技有限公司一家專注於(yú)生命科學的科技企業,由在國内科研試劑領域有著(zhe)豐富從業經驗的技術團隊和管理團隊組建而成,專營進口生物試劑,科學儀器,實驗消耗品等。
       公司将不斷把上優質的産(chǎn)品引入國内市場 ,滿足客戶的需求,公司也将緊跟生命科學的發展,爲廣大科研工作者探索生命科學的奧(ào)秘奉獻綿薄之力.

Polysciences全國代理-上海鼎桑

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PEI轉染手冊

轉染操作流程:
 
  1、細胞傳代:

轉染前24h内分離293T細胞至含10%胎牛血清的DMEM培養基 中進行傳代培養,接種密度如下:
         6孔闆:0.5x106細胞
         10cm培養皿:4.0x106細胞
         15cm培養皿:9.0x106細胞

2、轉染

轉染前将所有試劑(jì)置於(yú)室溫。

2.1質粒DNA的稀釋

在無菌試管中,用無血清的DMEM W / O酚紅培養基(濃度爲10%)稀釋質粒DNA(ug)。病毒包裝體(psPAX2):病毒包膜(pMD2G)和重組質粒DNA的稀釋比例分别爲4:2:1。
       

6孔闆:200ul+3ug的DNA
        10cm培養皿:1ml+7-8ug的DNA
        15cm培養皿:2ml+11-12ug的DNA

   2.2 轉染複合體形成

将PEI(1ug/uL)加入已稀釋的總DNA中,PEI與DNA(ug)的混合比率爲3:1。加入後立即渦旋混合 。
      

 6孔闆:9ul PEI複合體(1ug/ul)=9ug
        10cm培養皿 :21ul PEI複合體(1ug/ul)=21ug
        15cm培養皿:33ul PEI複合體(1ug/ul)=33ug
将添加到細胞的DNA/ PEI的混合物在室溫下孵育15分鍾。


4、收獲轉染細胞

轉染後48小時内收獲轉染細胞/或病毒上清。
 
試劑的配制:
PEI(1ug/ul) Polysciences(CAT#23966-2配制成儲液:)
1、将無内毒素的無菌水加熱至80℃左右溶解PEI,冷卻到室溫 。
2、調整pH值至7.0,用0.22um的濾器過濾消毒,分裝後儲存在-20℃。工作液可保持在4℃

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